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在生命科学和药物研发领域,实时、动态地了解细胞的能量状态和代谢功能至关重要。细胞的代谢,特别是线粒体呼吸和糖酵解,是细胞健康、增殖、分化和应对环境刺激的核心。安捷伦Seahorse XFe96分析仪正是为此而生的强大工具,它已成为全球众多顶尖实验室进行细胞代谢分析不可或缺的金标准平台。
Seahorse XFe96技术的革命性在于其能够实时、动态地测量活细胞在培养板中的代谢速率,而无需破坏细胞或使用标记物。其核心技术原理基于精密的多参数传感器探针板。
实时同步测量耗氧率(OCR)和产酸率(ECAR):
耗氧率(OCR): 直接反映线粒体呼吸链的活性,是评估细胞有氧呼吸和线粒体功能的关键指标。通过测量细胞周围溶解氧的消耗速率来计算。
产酸率(ECAR): 主要反映糖酵解途径的速率,是评估细胞无氧代谢能力的重要指标。通过测量细胞周围培养基的酸化速率(主要是乳酸积累)来计算。
通过同步监测OCR和ECAR,研究人员可以全面描绘细胞的能量代谢表型,区分细胞是偏向于高效的有氧呼吸还是偏向于快速的糖酵解。
独特的检测原理: XFe96检测板底部嵌有敏感的生化传感器。将检测板插入仪器后,仪器会精确控制一组微型注射器,在实验过程中自动、定时地将多达四种不同的代谢调节化合物(如寡霉素、FCCP、鱼藤酮/抗霉素A等)注入每个微孔,从而对细胞施加特定的代谢压力。
“细胞有氧呼吸压力测试”: 这是Seahorse技术的标志性实验方案。通过依次注入不同的药物,可以系统地评估线粒体功能的多个关键参数:
基础呼吸
ATP产量
质子漏
最大呼吸能力
备用呼吸能力
非线粒体呼吸
这类似于对心脏进行“压力测试”,但对象是细胞的线粒体,能够极其灵敏地揭示细微的代谢功能障碍。
高通量: “96”代表其通量,能够同时进行多达96个样本的检测。这对于药物筛选、基因筛选(如与CRISPR技术联用)或大规模样本统计来说,极大地提高了实验效率和数据的可靠性。
保持细胞原位状态: 整个检测过程在细胞培养板中进行,细胞始终处于熟悉的培养环境中,避免了胰酶消化、离心等操作对细胞代谢状态造成的应激和干扰,确保了数据的真实性和准确性。
应用广泛: XFe96的应用范围极其广阔,几乎覆盖了生物医学研究的各个角落:
癌症研究: 研究著名的“瓦博格效应”(癌细胞偏好糖酵解),探索肿瘤代谢重编程机制,筛选靶向代谢的抗癌药物。
神经科学: 研究神经退行性疾病(如阿尔茨海默病、帕金森病)中线粒体功能障碍的作用。
免疫学: 解析免疫细胞(如T细胞、巨噬细胞)在不同活化状态下的代谢转换。
代谢性疾病: 探究脂肪、肌肉、肝脏细胞在肥胖、糖尿病等疾病中的代谢异常。
干细胞生物学: 比较干细胞的代谢特征,以及分化过程中代谢模式的变化。
药物开发与安全性评价: 评估候选药物对细胞代谢的影响(药效)以及潜在的线粒体毒性(安全性)。
数据丰富且直观: 仪器配套的Wave软件能够自动控制实验流程、采集数据并进行强大的分析。结果以动态曲线图呈现,直观展示细胞代谢对药物注射的实时响应,并可进行多参数的统计分析。
2021款安捷伦Seahorse XFe96完整系统在继承前辈所有优点的同时,进一步优化了用户体验和系统性能。它通常包括经过验证的试剂盒、更简化的操作流程以及更强大的软件支持,确保研究人员能够更快地上手并获得高质量、可重复的数据。安捷伦作为科学仪器领域的领导者,提供了全面的技术支持和应用开发服务,帮助用户解决前沿的科学问题。
总而言之,安捷伦Seahorse XFe96分析仪不仅仅是一台仪器,更是一个强大的细胞代谢研究平台。它以其独特的技术优势,将细胞代谢研究从静态的“快照”时代带入了动态的“实时电影”时代。通过提供前所未有的洞察力,它持续推动着基础研究、转化医学和药物研发的进步,帮助全球科学家更深入地理解生命的能量奥秘,并最终为攻克重大疾病贡献力量。
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